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SUMMARY:Soutenance de thèse Héloïse BALDO - Vendredi 10 Janvier à HUIS-
 CLOS
DESCRIPTION:Héloïse BALDO\nsoutiendra sa thèse\nle Vendredi 10 Janvier 2
 025\nà huis-clos\n"Un bioprocédé éco-efficient pour la conversion dire
 cte du méthane en méthanol : compréhension mécanistique et voies d'opt
 imisation"\n&nbsp\;\nDevant le jury composé de :\n- Mme Claire JOANNIS-CA
 SSAN\, Professeure\, Toulouse INP - ENSIACET - Rapporteure\n- M. Étienne 
 PAUL\, Professeur\, TBI INSA Toulouse - Rapporteur\n- M. Saïd ASSOU\, Ing
 énieur de recherche\, IRMB Montpellier INSERM - Examinateur\n\n- M. Maxim
 e POINTIE\, Professeur\, Université d'Angers - Examinateur\n- M. Éric TR
 ABLY\, Directeur de recherche\, INRAE LBE Narbonne - Examinateur\n- Mme La
 urence SOUSSAN\, Maître de conférences HDR\, ENSCM - Directrice de thès
 e\n\n&nbsp\;\n\nRésumé:\n\nCe travail a étudié un procédé biotechnol
 ogique de valorisation du méthane en méthanol. A l’heure actuelle\, ce
 tte oxydation est réalisée à l’échelle industrielle par des procéd
 és chimiques multi-étapes consommateurs d’énergie et de sélectivité
  variable. Des voies alternatives plus durables sont donc à l’étude. D
 ans ce cadre\, les bioprocédés mettant en œuvre des bactéries méthano
 trophes font l’objet d’un intérêt accru. Ces bactéries ont pour par
 ticularité d’utiliser le méthane comme source de carbone et d’énerg
 ie. Elles sont capables notamment d’oxyder sélectivement le méthane en
  méthanol en une seule étape (réaction d’hydroxylation)\, à pression
  ambiante et température modérée (aux alentours de 30°C). Elles cataly
 sent cette réaction grâce à l’enzyme Méthane MonoOxygénase (MMO)\, 
 ne générant que de l’eau comme co-produit. Le méthanol est un métabo
 lite intermédiaire des bactéries méthanotrophes\, normalement suroxydé
  par l’enzyme Méthanol Déshydrogénase (MDH). Pour accumuler le métha
 nol dans le milieu de réaction (MR)\, il est donc nécessaire d’inhiber
  la MDH et d’ajouter un donneur externe d’électrons dans le MR. Le fo
 rmiate\, peu cher et pouvant être biosourcé\, est le donneur le plus cou
 ramment utilisé.\n\nLe développement de ce bioprocédé attractif est n
 éanmoins freiné par un temps de production faible (de l’ordre de la di
 zaine d’heures)\, observé pour toutes les souches bactériennes ou bior
 éacteurs mis en œuvre. Les causes de cet arrêt de production ne sont pa
 s encore élucidées à ce jour et sont le sujet de cette étude. Des hypo
 thèses de limitations chimiques du procédé et des causes biologiques on
 t été avancées puis évaluées expérimentalement avec la souche métha
 notrophe modèle Methylosinus trichosporium OB3b en réacteur fermé. Une 
 étude omique (transcriptomique et protéomique) a par ailleurs été dév
 eloppée pour appréhender les phénomènes moléculaires mis en jeu. L’
 ensemble des résultats obtenus a permis d’identifier l’origine de l
 ’arrêt de production en méthanol. Des solutions pour relancer l’acti
 vité hydroxylante des bactéries en cours de réaction ont été proposé
 es. Ces solutions\, qui ne sont pas détaillées dans ce résumé pour des
  raisons de confidentialité\, ont pu être validées expérimentalement.\
 n\nMots clefs : méthane\, méthanol\, biohydroxylation\, Methylosinus tri
 chosporium OB3b\, optimisation de procédés\n\n&nbsp\;\n\nAbstract \n\nTh
 is work investigated a bioprocess valorizing methane (CH4) into methanol. 
 This oxidation is currently performed at an industrial scale by multi-step
 \, energy-intensive processes whose selectivity may vary. Alternative sust
 ainable processes are hence to be explored\, drawing attention to attracti
 ve bioconversions based on methanotrophic bacteria. These microorganisms h
 ave the ability to use methane as carbon and energy source. Their Methane 
 MonoOxygenase (MMO) enzyme selectively catalyzes methane oxidation into me
 thanol (i.e.\, hydroxylation) in a single-step reaction under ambient pres
 sure and mild temperatures rounding 30°C. Water is the sole byproduct gen
 erated. Methanol is an intermediate metabolite in methanotrophic metabolis
 m\, oxidized by the Methanol DeHydrogenase (MDH) enzyme. Accumulating meth
 anol in the reaction medium therefore requires to inhibit the MDH and supp
 ly an external electron donor. Inexpensive and potentially bio-sourced\, f
 ormate is widely used for this purpose.\n\nFurther development of this app
 ealing bioprocess is hampered by a short production time (about ten hours)
 \, encountered by all bacterial strains and bioreactor designs. The causes
  for this production stop are not elucidated up to day and represent the h
 eart of this study. Chemical limitations and biological reasons have been 
 hypothesized and experimentally tested. The model strain Methylosinus tric
 hosporium OB3b was implemented in batch reactors. A multiomic (transcripto
 mic and proteomic) study was carried out to elucidate the molecular phenom
 ena at stake during the desired bioreaction. The obtained results allowed 
 to identify the causes of the methanol production stop. Several solutions 
 for restarting M. trichosporium OB3b hydroxylating ability were considered
  and validated experimentally. For confidentiality purposes\, these result
 s may not be disclosed in this summary.\n\nKeywords: methane\, methanol\, 
 biohydroxylation\, Methylosinus trichosporium OB3b\, process optimization
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